免疫缺陷鼠 DK-NPG Mice

命名：NOD-Prkdc^scid H2-K1^em1 H2-Ab1^em1H2-D1^em1 Il2rg^tm1/Vst

毛色：白色(白化)

來源：動物引種自 Charles river 北京的合作夥伴 Vitalstar。DK-NPG 繼承了 NPG 的特性，具有嚴重複合免疫缺陷 (scid)、Il2 受體 γ 鏈之缺損，更透過 CRISPR-Cas9 將 NPG小 鼠 17 號染色體的 IA、H2D 與 H2K 基因剃除。於免疫不全動物移植 Hu-PBMC 後，能夠減緩移植物抗宿主症 GVHD 反應並延長實驗期，提供了更合適的擬人化小鼠與治療藥物模型。

應用：人類細胞組織移植、腫瘤與腫瘤幹細胞研究、幹細胞與誘導型幹細胞IPS研究、造血與免疫學研究、人類疾病感染模型研究、人源化動物模型研發。

1. MHC I/II 檢測
   
   圖一、 DK-NPG 小鼠流式細胞儀分析 MHC I 與 MHC II
   收集 DK-NPG 與 NPG 小鼠外周血，透過流式細胞儀分析 MHC I（mH-2Kd/mH2-Db；左）
   和 MHC II（mI-A；右）的表達情況，顯示 DK-NPG 小鼠已敲除 MHC I 與 MHC II。
2. 透過 DK-NPG 小鼠注射人源 PBMC 產製人源化小鼠
   
   圖二、NPG 與 DK-NPG 接種 HuPBMC 後之生存率、體重曲線及 GVHD 評分NPG 與 DK-NPG 小鼠接種 Hu-PBMC 5×106 與 1×107 細胞後的生存率、體重及 GVHD 評分*GVHD 評分時每組 5 隻，顯示平均值數據DK-NPG 移植 Hu-PBMC 後，可存活更長時間、體重穩定增長、更輕的GVHD症狀。

 

圖三、NPG 與 DK-NPG 小鼠接種 Hu-PBMC 後免疫細胞重建效率

DK-NPG 在接種不同劑量 Hu-PBMC 後，能夠重建人類免疫系統，且趨勢基本一致，顯示 DK-NPG 具有模型穩定性與優良重建效率。其中接種 1E7 Hu-PBMC 後重建效率最高可達 60% 左右，實驗期可達 14 週；主要重建的細胞為人的 D3 T 細胞，主要分化的 hCD3 T 細胞群為 hCD4 與 hCD8，其中 hCD4 細胞呈上升趨勢，hCD8 細胞呈下降趨勢。此模型可用於評估不同 CD3 T 細胞亞群之功能，探索其在 GvHD 發展中的作用。